天然产物分离纯化及结构鉴定

发布时间:2020-02-26 13:54

通过优化色谱条件,采用DAD、ELSD、MS等多种检测器对药材或者客户提供样品的分析,在诗丹德实验室确认客户指认的色谱峰或者化合物。在对指定目标峰或者化合物的结构类型、溶解性、稳定性以及含量的充分了解的基础上,制定提取、富集、分离、去杂方案,并在项目实施过程中通过HPLC-DAD/ELSD/MS多种检测器进行实时监测,及时修正制备方案,以保证项目的顺利推进。

目标化合物利用高分辨质谱仪、核磁仪、旋光仪、圆二色谱和单晶衍射等结构表征手段,确定其结构;

对质量控制用标准物质按照《国家药品标准物质研制技术要求》进行研制和标定。

1.1    质谱引导的指定及新化合物制备鉴定

1.1.1   指定色谱峰的分离制备鉴定

该类项目难点在诗丹德实验室准确确认客户指定的色谱峰。
基于诗丹德丰富的备选色谱柱和检测器类型,重现客户的色谱方法,通过色谱峰的保留时间、紫外光谱和质谱信息,在诗丹德实验室确认客户指定的色谱峰。在客户确认的基础上,采用诗丹德大样处理的流程化实验方案,对指定色谱峰进行提取、分离、纯化。全过程中采用HPLC-DAD/ELSD/MS监测、跟踪目标色谱峰,确保工作的顺利开展;利用高分辨质谱仪、核磁仪、旋光仪、圆二色谱和单晶衍射等结构表征手段,确定目标色谱峰的结构。
 
1.1.2   新化合物的制备鉴定

该类项目难点在确定新化合物的监测方法。
依托新化合物类型的物理化学性质与文献报道的已知化合物的差异,研究新化合物的监测方法。在此基础上确定药材采集量、制定目标化合物的提取、富集和除杂方案。实验全过程,采用HPLC-DAD/ELSD/MS监测目标化合物的含量和稳定性,确定合理的实验方案,保证项目的及时交付。
 
1.1.3   指定化合物的分离纯化鉴定

该类项目难点在无对照品的情况下,如何确保分离化合物是客户指定的化合物,而非其同分异构体或者立体异构体。
在充分了解指定化合物的色谱、光谱、质谱等表征信息的基础上,利用诗丹德基于天然产物高分辨质谱数据库,确定目标化合物的专属性检测方法,保证项目的及时交付。
 
1.2     活性引导的活性化合物制备鉴定

该类项目难点在于如何有效降低活性成分在跟踪分离过程中的损失。
通过采用多种药材提取方案、活性跟踪过程中同一个样品采用多种分离方法互补的方案,减少活性化合物的丢失、损失等因素造成对活性跟踪实验的干扰。

1.3     药用植物中特定类型系列化合物的制备鉴定

该类项目难点在于同一结构类型化合物的高效分离、纯化。
通过提取、分离过程中,多种色谱手段和溶剂处理方法有机结合的策略,将同一类型的化合物分散到不同的粗品中,为同一类型化合物的高效制备减低干扰因素。
 
1.4     毒性等限量化学成分的制备鉴定

项目的难点在于制备获得足够量的含量极低的毒性和限量成分。
依托诗丹德的植物鉴定和收集能力,HPLC-DAD/ELSD/MS联用筛选获得含量相对目标化合物含量较高的来源植物,在此基础上通过,基于目标化合物的物理化学性质,制定科学合理的提取富集方法,保证项目的高效开展。

1.5     中药化学标准物质的制备

该类项目难点在于保证获得符合国家药品标准物质研制技术要求的标准物质。
基于诗丹德10余年在标准物质制备和标定的技术积累和流程建设,从项目方案制定中充分考虑影响其稳定性、均一性和准确定值的一系列因素,并在项目过程的重要节点进行监控,对不符合技术要求的制定及时调整方案,进而保证项目高质量完成。
 
1.6     药物杂质对照品的制备鉴定和标定

该类项目难点在于高效获得足够量的指定杂质对照品。
药物杂质在药品中含量很低,大多在0.5%以下,其中含量相对较高的杂质,一般情况下客户都能明确其结构。但对于含量更低的杂质,基本上都只能通过分离纯化获得后才确定其结构。在诗丹德实验室准确确认客户指定药物杂质的基础上,基于主成分和目标杂质的色谱、光谱、质谱数据等信息,制定科学合理的特定杂质富集方案,从而保证杂质的高效制备。